無血清培養基由營養*的基礎培養基添加激素,生長因子,貼壁因子和結合蛋白而組成。
(一)基礎培養基
早期用于細胞培養的基礎培養基有血漿凝塊,淋巴液,大豆蛋白胨和胚胎浸膏等天然培養基。1950年Morgan等在前人的研究基礎上研究出199培養基,是動物細胞培養基發展到一個嶄新的階段,及合成培養基階段。合成培養基是按細胞生長需要將一定比例的氨基酸、維生素、無機鹽、葡萄糖等組合成的基礎培養基。目前市場上已經有上百種的合成培養基商品。在眾多的合成培養基中,MEM、DMEM、RPMI 1640、F12、和TC100的使用。
基礎培養基的成分是*已知的,因此在無血清培養基對不同的細胞株進行培養時可以對基礎培養基的某些組分進行相應的調整,以更好的符合細胞株的營養要求或提高目的蛋白的表達量。
(二)主要添加因子
又稱補充因子,是代替血清的各種因子的總稱。多數無血清培養基必須補加3—8種因子,任何單一因子都不能取代血清。已知有100多種此類因子,其中有些是必須補充因子,如胰島素、亞硒酸鈉和轉鐵蛋白,其他多數為輔助作用的因子。